新技术:红外光谱法可用于定量检测移植肝脏脂变水平
2014-12-22 14:05:18 来源: 作者: 评论:0 点击:
肝移植是肝硬化和肝细胞癌的重要治疗方法,但是由于肝源短缺,一些质量较差的移植肝脏可能引起移植物无功能或功能不良。脂肪变性就是一种影响移植肝脏功能的重要因素,它定义为肝细胞内甘油三酯积聚,从而导致脂质囊泡的形成。
肝移植手术术中评估移植肝脏脂肪变性水平目前的金标准是术中快速冰冻切片病理学检查。定量评估的标准即脂肪占细胞质的百分比。一般当该百分比大于60时,大多数外科医生选择放弃移植,因为移植失败的风险相当高。当该百分比小于30时,会导致较小的移植肝脏损伤。而百分比在30-60之间时,移植后发生移植物原发性无功能的风险率为0%-75%。
然而,冰冻切片的评估并不精确。肝移植术中时间紧迫,可能会导致切片组织的形态学损伤,影响脂肪变性的准确评估(见图1A);另外,病理切片评估结果与真实的肝脏组织脂肪含量有一定的出入,这已经通过气相色谱-质谱仪证实。因此,我们需要一项能替代冰冻切片病理学检查的方法。
巴黎第十一大学的Fran?ois Le Naour教授等介绍了一项评估移植肝脏脂肪变性水平的新技术——显微红外光谱法,并将其研究结果发表于近期的Gastroenterology杂志。
显微红外光谱法是利用特征吸收谱带强度的改变对混合物及化合物进行定量分析,广泛用于生物化学材料的检测。
该团队运用显微红外光谱法对27份肝脏手术中的组织样本(由病理检查证实脂肪水平范围0-90%)进行检测。在病理检查显示正常的非脂肪变性区域也检测出了脂类物质的不同密度变化,这说明该方法能够检测出肝脏组织中细微的化学变化。他们还发现,500×500μ㎡的区域内进行观察,就能代表整块组织切片区域。
脂肪成分的定量描述,是将脂类物质的相关光谱密度与蛋白质的相关光谱密度相比来表示(图1C)。这个比值将不同组织切片厚度进行了标准化,消除了偏倚。之后,将每个患者的测得的脂类/蛋白质比值制成关于甘油三酯浓度的函数图(图1D)。最后,画出一条标准的曲线就能定量估算脂肪变性的水平。通过显微红外光谱法测定的甘油三酯水平与真实值相近(图1E)。
图1A.冰冻切片HE染色。B. 气相色谱-质谱仪测得的脂肪变性水平。C.虚线区域内进行显微红外光谱分析。D.脂类/蛋白质比值与甘油三酯浓度的函数图。E气相色谱-质谱仪与显微红外光谱分析对比。
图2A衰减全反射-傅立叶变换红外光谱仪与一电脑相连。B电脑屏幕显示的分析结果。
综上所述,显微红外光谱法能够定量估计组织切片的脂肪含量,这项快速测定的方法能够方便的用于评估肝移植手术中的移植物质量。
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